Experiment voor de identificatie van onbekende bacteriën (figuur)

Experiment voor de identificatie van onbekende bacteriën (figuur)

Experiment voor de identificatie van onbekende bacteriën!

Identificatie van onbekende bacterie is een van de belangrijkste taken van de microbiologen. Monsters van bloed, weefsel, voedsel, water en cosmetica worden wereldwijd dagelijks onderzocht in laboratoria voor de aanwezigheid van contaminerende micro- organismen.

Bovendien zijn industriële organisaties voortdurend schermmaterialen nieuwe antibiotica microben of microben die de opbrengst van verkoopbare producten, zoals vitaminen, oplosmiddelen en enzymen toenemen isoleren. Eenmaal geïsoleerd, moeten deze onbekende bacteriën worden geïdentificeerd en geclassificeerd.

De wetenschap van de indeling heet taxonomie en gaat over de scheiding van levende organismen in elkaar verbonden groepen. Bergey ’s Manual of bacteriologie, 8e editie, is de officiële taxonomische sleutel die de orden, families, geslachten en soorten van alle bekende geclassificeerde bacteriën (Bijlage III).

De fundamentele kennis kleuringen, isolatietechnieken, bacteriële voeding, biochemische activiteiten en groeikenmerken bacteriën, wordt het gemakkelijker voor de identificatie van onbekende bacteriën.

Kenmerken van enkele bacteriën gegeven in tabel 7.2. Andere bacteriën kunnen worden geïdentificeerd op een soortgelijke wijze op basis van de waarnemingen en de resultaten verkregen volgens de experimentele procedures.

Dia’s, holte glijbanen, petrischaaltjes, erlenmeyers, katoen stekkers, het enten lus, autoclaaf, bunsenbrander, laminaire stroming kamer, vervreemden kruik, incubator, voedingsmiddel bouillon, nutriënt agar, gram kleurstoffen, media en reagentia voor biochemische tests, samengestelde microscoop , geïsoleerde kolonies of zuivere culturen van bacteriën.

1. Gram kleuring van het onbekende bacteriën wordt uitgevoerd. Naast gram kleuring, wordt de morfologie en inrichting ook geregistreerd. Motiliteit test van de bacteriën wordt bepaald door opknoping druppel preparaat (figuur 7.25).

2. Gebruik steriele enten techniek wordt de bacteriën geënt in twee nutriënt agarslants een voedingsbodem buis en een voedingsstof agarplaat via streak inoculatie. Na incubatie, wordt een schuine cultuur gebruikt om de culturele kenmerken van de onbekende bacteriën te bepalen.

De tweede wordt gebruikt als een voorraad subcultuur, mocht het nodig zijn om een ​​van de proeven te herhalen. Groeikenmerken worden ook waargenomen in de bouillon buis kolonie kenmerken plaat.

3. Zorgvuldig in steriele techniek, om niet te kweken besmetten en aldus valse resultaten te verkrijgen, wordt de bacteriën geënt in respectievelijke media verschillende biochemische tests uit te voeren.

4. De geënte media geïncubeerd bij de gewenste temperatuur voor de gewenste tijdsduur.

1. Gram-kleuring, behalve gram reactie, de morfologie en opstelling van de bacteriën worden ook opgenomen.

2. De culturele kenmerken van de bacteriën in voedingsbouillon, op schuine agar en nutriënt agar plaat wordt genoteerd.

3. De resultaten van de biochemische reacties geregistreerd.

Interpretatie van de resultaten:

1. Met behulp van de hierboven opgenomen gegevens (bijvoorbeeld, zie tabel 7.1) en met de hulp van de Bergey ’s Manual of bacteriologie, de bacterie is geïdentificeerd als haar geslacht en de soort. Het moet er rekening mee worden gehouden dat de resultaten kunnen afhankelijk van de spanningen van elke gebruikte soort en de duur van de bacteriën is in voorraadcultuur gehandhaafd.

De waargenomen resultaten kunnen niet volledig identiek aan de verwachte resultaten. Daarom is de bacteriën die het beste past bij de resultaten worden gekozen. De identificerende kenmerken van weinig bacteriën in tabel 7.2 gegeven.

2. Als alternatief, met behulp van de hierboven opgenomen data, worden codenummers gegeven de vastgelegde resultaten (zie tabel 7.3) en de bacteriën gemakkelijk geïdentificeerd met behulp van computerprogramma vindt Apple II, IBM PC of TRS-80.

Het programma is ontworpen om de onbekende bacteriën op basis van percentage gelijkenis tussen de onbekende bacteriën en de bekende bacteriën te identificeren met betrekking tot de bovengenoemde waarnemingen.

Om het programma voor de Apple II of IBM-PC starten:

(A) De schijf wordt geplaatst in de linker-station.

(B) De computer is ingeschakeld.

(C) De programma-instructies worden gevolgd door het intikken van de antwoorden, onbekende bacteriën nummer en codenummers als de vragen die op het scherm verschijnen.

Om het programma te starten voor de TRS-80:

(A) De computer is ingeschakeld.

(B) De schijf wordt geplaatst in de onderste schijf.

(C) De oranje knop wordt ingedrukt.

(D) Toen hem werd gevraagd, de datum (DD / MM / YY) wordt ingevoerd.

(E) Oranje knop opnieuw wordt ingedrukt.

(F) programma-instructies worden opgevolgd door te typen in de antwoorden, onbekende bacteriën nummer en codenummers als de vragen die op het scherm verschijnen.

E. Geautomatiseerde methoden voor de identificatie van onbekende bacteriën :

Identificatie van onbekende bacteriën door de handmatige methode met behulp van kleuring reacties, beweeglijkheid test, culturele kenmerken en biochemische tests is een omslachtig, langdurig en tijdrovend proces. Om het proces eenvoudig en kort te maken, zijn automatische methoden ontwikkeld.

Deze werkwijzen gebruiken in principe dezelfde biochemische tests als in de handmatige methoden, maar hier is uitgevoerd in een automatische wijze en de interpretatie gebeurt met een computerondersteund programma.

Twee van dergelijke systemen momenteel voor de automatische identificatie van de bacteriën worden gegeven als volgt:

1. MINI API System

2. VITEK 2 System

F. verdere bevestiging :

(1) serologische tests:

Serologische tests kunnen worden uitgevoerd voor verdere bevestiging van de geïdentificeerde bacteriën. Aan een suspensie van de geïdentificeerde bacteriën (zeg X), een daling van het antiserum (anti-X) tegen deze bacteriën wordt gemengd. Als dit leiden tot de vorming van klonten of precipitaten (X-X anti-complex), wordt de identificatie bevestigd.

De antisera voor verschillende bacteriën zijn commercieel verkrijgbaar. Ze worden commercieel geproduceerd in verschillende laboratoria. Het antiserum van specifieke bacteriën wordt geproduceerd door het injecteren van gedode of verzwakte cellen van de bacteriën (zeg X) in een proefdier.

Als een afweermechanisme, het gastheerdier produceert antilichamen (anti-X) tegen deze bacterie, die in het bloed blijft. Het bloed wordt verzameld uit het dier en zijn serum geïsoleerd door speciale technieken. Dit serum, bevattende antilichaam tegen deze bacteriën wordt de antiserum van deze bacteriën.

(2) PCR-test:

De polymerasekettingreactie (PCR) test is een snelle moleculaire werkwijze voor bevestiging van het geïdentificeerde bacteriën. Deze techniek wordt veel gebruikt voor het opsporen van verschillende bacteriën en virussen snel en nauwkeurig.

Ook u kunt bestellen hier.

Read more

Geef een reactie

Het e-mailadres wordt niet gepubliceerd. Verplichte velden zijn gemarkeerd met *

2 × drie =